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ELISA实验中标曲怎么做？
供稿：市场部
宣布时间：2024-01-19
浏览量：1469次
曲线绘制的使用工具
以下所述中使用的曲线绘制软件为Curve E xpert1.4, 列位先生们若有需要即可点击此链接下载自行下载使用；
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可以接纳种种绘图软件来绘制 ELISA 标准曲线，下面以“Curve Expert1.4”软件为例，绘制 ELISA 标准曲线的要领如下；
1．启动“Curve Expert”
2．X 轴输入标准品的 OD 值（双抗夹心输入 OD-空缺值），Y 轴输入所对应的浓度值，如图：
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3．单击[运行]
按钮，泛起如下对话框
4．单击[ok]按钮，泛起如下两个对话框，关闭下面一个对话框
5. 在对话框的右上角泛起一些曲线的名称，从“1”最先依次点击曲线名称，在右下角会泛起响应拟合的曲线。（一样平常选择第一个多项式拟合）
6. 凭证拟合的曲线选取 ELISA 拟合度最佳的曲线双击，泛起如下对话框：注重：选择系数（即“r”值）最好的曲线方程来举行运算。
在下面的对话框 右上角有“r”值
，当“r”值越靠近 1 拟合度越好
7．按[Ctrl]键+[L]键，泛起如下对话框：
8．输入标准的 OD 值，单击[Calculate]按忸，即可获得待测卵白的现实含量（标本稀释了 N 倍，运算出的数值应在乘以 N）。?
9. 如想获得 ELISA 拟合曲线的方程，可在办法 6 的对话框空缺处右击，选择”Information”
10. 获得如下对话框：点击“Copy”
在你需要的位置粘贴即可获得如下数据：
Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)?
Coefficient Data:?
a = -21.531017?
b = 212.05019?
c = -0.24054479 d = 0.018060778?
11. 修改作图中 X,Y 坐标轴高度以及相关属性 选择办法 9 所示图中的第二排“Graph Properties”，修改好后点击 OK 生涯
做标准曲线时有几个问题需要注重
1、样品的浓度是凭证标准曲线盘算出来的，以是要严酷凭听说明书指示举行操作，标准曲线能直接反应操作是否准确。
2、样品浓度较高时，应当稀释样本再举行检测，样品OD值在标准曲线规模内才华获得更准确的盘算效果。
3、标准曲线的样品数一样平常为7个点（除去零孔/配景孔），但至少要包管有5个点，当标曲有个体孔读数值不正常时，可以抠除。
注重事项四
4、夹心法的标曲制作和样本浓度盘算时需要减掉0孔配景值，竞争法不需要。
5、做出的标准曲线相关系数因实验要求差别而有所变换，但一样平常来说，相关系数R至少要大于0.99，R值越靠近1，说明标曲拟合越好。
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