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手艺专栏

通过两种软件盘算ELISA效果
金狮贵宾会-宾至如归-尊贵-显赫供稿:Technical division金狮贵宾会-宾至如归-尊贵-显赫宣布时间:2022-05-04金狮贵宾会-宾至如归-尊贵-显赫浏览量:4116次

要领一:使用Curve  Expert1.4软件(点击下载Curve  Expert1.4

标准曲线的绘制 

可以接纳种种绘图软件来绘制ELISA标准曲线,下面以“Curve  Expert1.4”软件为例,绘制ELISA标准曲线的要领如下;

1.启动“Curve  Expert”

2.X轴输入标准品的OD值(双抗夹心输入OD-空缺值),Y轴输入所对应的浓度值,如图:

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3.单击[运行] 图片 按钮,泛起如下对话框

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4.单击[ok]按钮,泛起如下两个对话框,关闭下面一个对话框

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5. 在对话框的右上角泛起一些曲线的名称,从“1”最先依次点击曲线名称,在右下角会泛起响应拟合的曲线 。

(一样平常选择第一个多项式拟合)

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6. 凭证拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击,泛起如下对话框:

注重:选择系数(即“r”值)最好的曲线方程来举行运算 。在下面的对话框

右上角有“r”值 金狮贵宾会-宾至如归-尊贵-显赫,当“r”值越靠近1拟合度越好

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7.按[Ctrl]键+[L]键,泛起如下对话框:

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8.输入标准的OD值,单击[Calculate]按忸,即可获得待测卵白的现实含量(标本稀释了N倍,运算出的数值应在乘以N) 。

 

9. 如想获得ELISA拟合曲线的方程,可在办法6的对话框空缺处右击,选择”Information”

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10. 获得如下对话框:点击“Copy”

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在你需要的位置粘贴即可获得如下数据:

Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)

Coefficient Data:

a =   -21.531017

b =  212.05019

c =  -0.24054479

d =  0.018060778

 

11. 修改作图中X,Y坐标轴高度以及相关属性

选择办法9所示图中的第二排“Graph Properties”,修改好后点击OK生涯

 

要领二: 使用OriginPro 2021软件盘算竞争法试剂盒ELISA效果

第一步:我们以PG(Progesterone) ELISA Kit 这个试剂盒为例

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将标曲的数据复制粘贴在如下表框中

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按下Ctrl+A键全选然后鼠标依次单击,Analysis---Fitting---Nonlinear Curve Fit---Open Dialog...

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在Function Selection选项卡中,将 Category 参数设置为 Statistics

将Function参数设置为 Logistic

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在Find X/Y选项卡中对 Find X from Y 举行勾选,然后单击 Fit 键

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横纵坐标选择Log10参数,注重from / to 的上下限值的选择,完成后单击OK 键

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最后效果盘算,竞争法由于OD值与样品浓度成反比关系,以是不需要减去零孔配景值,若是是夹心法的试剂盒,则还需要事先在excel中减去配景值然后再依据教程举行盘算 。

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